為了達(dá)到堿前處理效果,在生物酶前處理時(shí),需要加人乳化性、去疏水性物質(zhì)能力強(qiáng)的表面活性劑(如TX一10等).另外,生物酶的分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜,分子質(zhì)量大,滲透性差,為提高效果,有時(shí)尚需要加人棉纖維的溶脹劑f如尿素等).實(shí)際上棉織物的生物酶前處理是多種生物酶和多種助劑協(xié)同作用的結(jié)果.將淀粉酶和果膠酶同各種助劑預(yù)先混合配成復(fù)合酶制劑儲(chǔ)存,可縮短前處理配液周期,簡(jiǎn)化生產(chǎn)步驟.但是,各種酶之間復(fù)合對(duì)酶活性是否有影響,助劑對(duì)各種酶的酶活性是否有影響,以及復(fù)合酶的存放條件,如存放溫度、存放時(shí)間對(duì)酶活的影響尚沒有進(jìn)行過研究.本試驗(yàn)對(duì)由淀粉酶、果膠酶、非離子表面活性劑TX一10和尿素組成的復(fù)合酶液的存放條件、復(fù)合酶液中各組分對(duì)酶活性的影響進(jìn)行了研究.
1試驗(yàn)
1.1材料
純棉精梳府綢(14.5 x14.5,133x72)、DNS(3,5一二硝基水楊酸),TX一10、尿素,2000L淀粉酶、堿性果膠酶(丹麥諾維信公司),復(fù)合酶【質(zhì)量比m(淀粉酶):m(果膠酶):m(Tx一1O):m(尿素):m(水)=3:1:5:1O:2O】.
1.2純棉府綢織物復(fù)合酶前處理工藝
熱水預(yù)處理(95℃熱水洗3次,冷水洗1次,軋干)一三浸三軋酶液(復(fù)合酶液39 L,pH值6.5—7.0,軋余率50%以上)一汽蒸(70 oC,1 h)一熱水洗(3次)一冷水洗(1次)一烘干.
1.3測(cè)試方法
棉織物上果膠含量-草酸銨萃取一咔唑比色法團(tuán);復(fù)合酶中果膠酶酶活:紫外分光光度法測(cè)定果膠酶對(duì)底物果膠的裂解產(chǎn)物在239 nm下的吸光度(oo值),間接確定復(fù)合酶中果膠酶的酶活;復(fù)合酶中淀粉酶酶活:淀粉酶對(duì)底物可溶性淀粉酶解反應(yīng)生成的產(chǎn)物具有還原性,和DNS顯色劑反應(yīng)生成有色物質(zhì),采用分光光度計(jì)測(cè)定生成的有色物質(zhì)的吸光度(OO值)間接測(cè)定淀粉酶的酶活.
2結(jié)果與討論
2.1存放條件對(duì)單一果膠酶酶活的影響
表1是單一果膠酶在室溫和40℃下存放不同時(shí)間后測(cè)定的OD值.表2是在室溫和40℃下存放不同時(shí)間后的單一果膠酶對(duì)純棉府綢織物的果膠去除率.
由表1、表2可知,單一果膠酶在室溫和40℃存放后,酶解產(chǎn)物的吸光值沒有明顯變化.處理織物的果膠去除率也無(wú)大幅度變化,也證明了存放條件、存放溫度和時(shí)間不是造成復(fù)合酶液中果膠酶酶活下降的因素.
2.2存放條件和復(fù)合酶組分對(duì)果膠酶酶活的影響
2.2.1存放條件
用果膠裂解酶得到的裂解產(chǎn)物為不飽和半乳糖醛酸,分子結(jié)構(gòu)中含有不飽和共軛體系,在239 nm波長(zhǎng)下具有特征吸收峰[3】,因此,可以用果膠酶對(duì)果膠的裂解產(chǎn)物在239 nm波長(zhǎng)下的吸光度(OD值)來間接反映果膠酶的活力.OD值越大,果膠酶裂解產(chǎn)物越多,說明果膠酶的酶活越高.表3是復(fù)合酶在室溫和40℃下存放不同時(shí)間后測(cè)定在239 nm波長(zhǎng)下的OD值.表4是在室溫和40℃下存放不同時(shí)間后的復(fù)合酶對(duì)純棉府綢織物處理后的果膠去除率.
從表3和表4可知,室溫下存放的復(fù)合酶對(duì)果膠酶酶解產(chǎn)物的OD值隨存放時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸降低,而在40℃下存放的OD值迅速下降.果膠去除率,也有相同的規(guī)律,顯示出OD值和果膠去除率有很高的相關(guān)性.因此,用239 nlTl下的吸光度可以間接反映果膠酶的酶活性變化,也證實(shí)了存放條件或者復(fù)合酶中的其他組分對(duì)果膠酶酶活有嚴(yán)重影響.
2.2.2復(fù)合酶組分對(duì)果膠酶酶活的影響
除了果膠酶外,復(fù)合酶中還有淀粉酶、非離子表面活性劑TX一10、尿素等,這些組分可能對(duì)果膠酶的酶活產(chǎn)生影響.將果膠酶分別與淀粉酶、TX一10、尿素按一定比例混合后在室溫和40℃存放不同時(shí)間,測(cè)定果膠酶酶解產(chǎn)物的OD值以及對(duì)純棉府綢織物的果膠去除率.
2.2.2.1淀粉酶
表5是質(zhì)量比m(果膠酶):m(淀粉酶):m(水):1:3:20的復(fù)合酶液在不同溫度存放不同時(shí)間后,對(duì)底物果膠的水解產(chǎn)物在239 nm下的OD值,表6是上述酶液對(duì)純棉府綢織物果膠的去除率.